자유 티올 정량
자유 티올기는 시스테인 내의 황 원자가 형성하는 특별한 구조입니다. 자유 티올기는 매우 반응성이 높아 다른 단백질과 결합하여 그 구조와 기능을 변화시킬 수 있으며, 산소 분자와 반응하여 산화물을 생성해 세포와 조직에 손상을 줄 수 있습니다. 자유 티올기의 정량화는 항체 등의 단백질 생물제제의 중요한 검사 항목입니다. 예를 들어, 자유 티올기를 포함한 항체는 때때로 완전한 항체보다 생물학적 기능이 저하될 수 있으며, 차이가 클 수도 있습니다. 따라서 단백질 생물제제의 초기 공정 개발과 후속 생산 모니터링에 신속하게 대응하고 정확하게 정량화하는 것이 중요합니다.
자유 티올기 정량화
티올기와 이황화 결합은 효소 촉매, 보조 인자 결합 및 단백질 활성 구조 유지에 활성 그룹으로 참여하는 경우가 많습니다. 자유 티올기 함량은 단백질의 특성과 존재 방식에 큰 영향을 미치며, 생물의약품 과정에서 품질 검사의 중요한 단계입니다.
Ellman 방법은 자유 티올기 농도를 검출하는 일반적인 방법으로, DTNB 시약이 자유 티올기와 반응하여 2-니트로-5-티오벤조산(TNB-)을 형성하는 원리입니다. 중성 또는 알칼리성 pH 조건의 물에서 이온화되어 TNB2-이중 음이온을 생성할 수 있습니다. 이 TNB2-이온은 노란색을 띄며, 412nm에서의 가시광선 흡광도를 측정하여 TNB2-를 정량화할 수 있습니다. 그런 다음 시스테인 표준품을 사용하여 티올기를 정량화하거나 몰 흡광계수를 기반으로 티올기를 정량화하는 방법으로 자유 티올기를 정량화할 수 있습니다.
바이타이팩 생명과학기술 BTP는 CNAS/ISO9001 이중 품질 인증 시스템을 기반으로 7개의 검사 플랫폼을 구축하였으며, 그 중 자유 티올기 함량 검사 플랫폼은 CNAS 인증을 획득하여 완전한 방법학 개발 및 기술 이전 능력을 보유하고 있습니다. BTP는 또한 다른생물제제 특성 분석관련 서비스를 제공합니다. 자세한 내용은 확인하십시오.
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