단백질 상호작용 분석

단백질 상호작용은 두 개 이상의 단백질 분자가 결합하여 단백질 복합체를 형성하는 과정을 말합니다. 일반적으로 단백질은 단독으로 기능하기 어렵고, 여러 단백질 분자가 서로 협력하여 복잡한 세포 기능을 수행합니다. 따라서 단백질 상호작용에 대한 연구는 질병의 발생과 발전을 탐구하고 특정 질병의 예측 및 치료 방법을 발견하며 신약 개발 연구에 새로운 아이디어를 제공하는 데 유리합니다. 단백질 상호작용 분석 방법은 다양하며, 바이오테크는 단백질 상호작용 분석 서비스와 LC-MS/MS에 기반한 IP, Co-IP 샘플 및 GST 융합 단백질 풀다운 등의 정제 샘플의 질량 분석 서비스를 제공합니다. 자세한 내용은 다음을 참조하십시오:
단백질 상호작용 질량 분석
면역 공동 침강법(CO-IP)과 질량 분석을 결합한 단백질 상호작용 분석
GST 융합 단백질 풀다운 기술과 질량 분석을 결합한 단백질 상호작용 분석
SILAC과 면역 공동 침강을 질량 분석과 결합한 단백질 상호작용 분석

1, 면역 공동 침강법(CO-IP) 단백질 상호작용 분석

면역 공동 침강법(CO-IP)은 항원과 항체 간의 특이성을 이용하여 단백질 간의 생리적 상호작용을 검출하는 방법입니다. 실험에서 세포 내 단백질 상호작용을 최대한 보존하기 위해 비이온성 변성제를 사용하여 세포를 분해합니다. 세포가 분해될 때, 세포 내 단백질 상호작용이 보존되며, 특정 단백질과 결합하도록 적절한 항체를 추가한 후, 단백질 A/G를 추가하여 항체-단백질 복합체를 형성합니다. 이를 원심 분리하고 상층액을 제거한 후, 질량 분석 기술로 침전된 단백질을 식별하여 두 단백질 간의 상호작용을 증명합니다. 이 방법은 안정적이거나 강한 단백질 간 상호작용 분석에만 적합하며, 특정 목표 단백질과 다른 단백질 간의 상호작용을 식별하거나 목표 단백질과 상호작용할 수 있는 미지의 단백질을 찾는 데 사용됩니다.

바이오테크는 샘플 단백질의 추출, 발현 및 정제의 최적화 솔루션을 통해 고품질의 미끼 및 포획 단백질을 확보하여 고객에게 고품질의 Co-IP 단백질 상호작용 분석 서비스와 면역 공동 침강 CO-IP로 얻은 단백질의 질량 분석을 제공합니다.

 

바이오테크 단백질 상호작용 분석

• 장점: 자연 상태에서 상호작용하는 단백질 복합체를 분리할 수 있습니다.
• 단점: 민감도가 낮아 낮은 친화성 및 순간적인 단백질 상호작용 분석 감지가 불가능합니다.

2, GST 융합 단백질 풀다운 침전 기술의 단백질 상호작용 분석

GST 융합 단백질 풀다운 침전 기술은 GST 태그를 포함한 벡터를 목표 단백질 A에 삽입하여 글루타티온이 코팅된 비즈에 융합 단백질을 결합시키고, 세포 분해액을 추가한 후 상호작용하는 단백질을 융합 단백질에 흡착시킵니다. 과량의 글루타티온을 추가하여 세척한 후, MS 기술로 분석합니다. 이 방법은 주로 체외에서 강력하거나 안정적인 단백질 간 상호작용을 연구하는 데 사용되며, 두 개의 알려진 단백질 간의 직접적인 상호작용을 식별하거나 목표 단백질과 상호작용할 수 있는 미지의 단백질을 찾는 데 사용됩니다.

기술 의존형 과학 연구 서비스 회사로서 바이오테크는 단백질 상호작용 분석 서비스 및 질량 분석을 통한 단백질 상호작용 질량 분석에 다년간의 경험을 보유하고 있습니다. 바이오테크는 GST 풀다운 단백질 상호작용 분석 서비스와 풀다운 타겟 단백질 질량 분석 서비스를 제공합니다. 엄격한 품질 관리와 짧은 검사 시간을 자랑하며, 바이오테크는 프로젝트의 유전자 합성에서 데이터 보고서까지의 모든 단계에 걸쳐 맞춤형 원스톱 서비스를 제공합니다.
• 장점: 세포 내 다른 상황의 간섭을 배제할 수 있습니다; 단백질 간의 상호작용 여부를 직접 탐지할 수 있습니다; 방법이 간단하고 조작이 편리합니다.
• 단점: 세포 외부에서 수행되므로 세포 내 단백질 상호작용 관계를 정확하게 반영할 수 없습니다.

3, SILAC와 면역 공동 침강 질량 분석을 결합한 단백질 상호작용 분석

SILAC 방법을 사용하여 실험군과 대조군 세포를 각각 표지한 후 Co-IP 실험을 수행하고, 항원과 항체 간의 특이적인 반응으로 면역 복합체를 분리합니다. 그런 다음 LC-MS/MS를 통해 면역 복합체 내의 단백질을 정성/정량적으로 분석합니다. 실험군과 대조군에서 특정 단백질의 양이 통계적으로 유의한 차이를 보일 때, 이 단백질이 연구 대상 단백질과 상호작용한다고 판단하며, 단백질 상호작용의 가양성 결과 가능성을 크게 줄일 수 있습니다. SILAC 기술과 Co-IP-MS 기술의 결합은 특정 상황에서 단백질 상호작용 네트워크를 고처량으로 정량 분석하는 데 사용됩니다.

바이오테크는 Thermo Fisher의 Q ExactiveHF 질량 분석 플랫폼, Orbitrap Fusion 질량 분석 플랫폼, Orbitrap Fusion Lumos 질량 분석 플랫폼과 Nano-LC를 결합하여 SILAC과 면역 공동 침강 질량 분석을 결합한 단백질 상호작용 분석 서비스 패키지(SILAC-based CoIP-MS)를 제공합니다. 고객님은 실험 목표를 저희에게 알려주시고, 세포를 보내주시면, 저희가 프로젝트의 후속 모든 사안을 책임지며, 여기에는 세포 배양, 세포 표지, 단백질 추출, 항체 IP, 효율성 검사, 단백질 절단, 펩타이드 분리, 질량 분석, 질량 분석 원시 데이터 분석, 생물 정보학 분석이 포함됩니다.

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