단백질 가수분해

자연계에서 발견되는 단백질 크기는 5kDa에서 400kDa까지 다양합니다. 단백질 가수분해 과정은 단백질을 더 짧은 조각, 즉 펩타이드로 자르는 과정으로, 단백질 가수분해는 펩타이드 질량분석 식별 분석 이전에 매우 중요한 단계입니다. 이는 단백질 식별 및 특성화, 생물표지자 발견의 성공적인 수행을 위한 기초입니다. 질량분석을 통해 전체 단백질을 연구할 수 있지만, 더 작은 펩타이드가 단백질 식별에 더 용이합니다. 이는 용해성과 이질성으로 인해 단백질 피복률이 감소할 수 있기 때문입니다. 따라서 가장 일반적인 단백질체학 방법은 위치 특정 효소 절단점을 사용하여 더 작은 펩타이드 조각을 생성합니다. 작은 질량의 펩타이드는 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC) 및 HPLC 결합 질량분석을 통해 더 쉽게 분리되고 특성화될 수 있습니다.

바이타이파크의 질량분석 기반 단백질 식별 예시

BTP-단백질 가수분해 서비스

바이타이파크 생명과학은 두 가지 단백질 가수분해 방법을 제공합니다: (1) 젤 내 가수분해(폴리아크릴아마이드 젤 매트릭스 내의 단백질 가수분해); (2) 용액 내 가수분해(단백질을 클로로포름/메탄올에 침전시킨 후 요소에 재용해하여 수행). 일차 또는 이차원 젤 전기영동으로 분리된 단백질은 젤 내에서 직접 가수분해될 수 있으며, 젤 내 가수분해는 효과적이고 재현성이 좋지만 상당한 노력과 시간이 필요합니다. 젤 내 가수분해에 비해 용액 내 가수분해는 더 적은 노력이 필요하며 시간이 덜 소요되지만 용액 내 가수분해된 단백질은 재용해도가 낮아져 일정한 샘플 손실이 발생할 수 있습니다.

단백질 가수분해의 과정

바이타이파크 생명과학은 젤 내 가수분해와 용액 내 가수분해 모두를 제공합니다. 단백질 가수분해의 작업 과정은 다음과 같습니다:

1. 용해액 준비;
2. 용액 내 또는 젤 내에서 효소 절단;
3. 요소 및 구아니딘과 같은 변성제를 사용하여 단백질 변성;
4. DTT를 사용하여 이황화 결합을 환원;
5. 아이오도아세트산 또는 아이오도아세트아미드를 사용하여 시스테인 알킬화;
6. 시약 제거 및 완충액 교환;
7. 적절한 pH와 온도에서 트립신 또는 다른 단백질분해효소를 사용하여 탄산수소암모늄 완충액에서 약 18시간 동안 변성;
8. 효소 절단을 멈추기 위해 산성 물질을 첨가;
9. 단백질 농축/세척.

단백질 가수분해의 작업 과정

샘플 요구 사항
바이타이파크 생명과학은 다양한 유형의 샘플을 처리할 수 있으며, 다음에 국한되지 않습니다:

천연 유래 단백질;
재조합 유래의 융합 단백질 및 표지 단백질;
다양한 아형의 항체;
막 단백질 및 기타.

단백질 효소 절단의 장점

• 유연성: 우리는 젤 내 및 용액 내 가수분해 두 가지 단백질 가수분해 전략을 제공합니다;
• 높은 정확성과 커버리지: 우리의 가수분해 서비스는 질량분석의 정확성과 커버리지를 크게 향상시킬 수 있습니다.
• 광범위한 응용: 단백질 식별 및 특성화, 질병의 생물표지자 발견을 촉진하고 생물학적 과정을 이해하는 데 도움이 됩니다.
• 완전한 단백질체학 서비스: 우리는 단백질체학 분석의 전체 과정을 포괄하는 완전한 단백질체학 서비스를 제공하며, 가수분해 후 샘플을 분석 및 측정하여 한 번에 여러분의 체학 문제를 해결해 드립니다.

바이타이파크 생명과학은 또한 고속 자동화 단백질 가수분해 서비스를 제공하며, 상담을 환영합니다.