라우릴 황산 나트륨 폴리아크릴아마이드 겔 전기영동(영어: sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis, 약칭 SDS-PAGE)은 흔히 사용되는 단백질 정제 분석 기술입니다. SDS-PAGE는 서로 다른 단백질 분자가 가진 전하의 차이와 분자 크기에 따른 이동 속도의 차이를 이용해 단백질을 분리합니다. 단백질 샘플에 여러 단백질이 포함되어 있거나 정제된 단백질 샘플에 다른 불순물 단백질이 포함된 경우, SDS-PAGE를 통해 여러 단백질 띠로 분리됩니다. 만약 정제된 샘플이 동일한 단백질만 포함하고 있다면, 단백질 샘플 전기영동 후 단 하나의 단백질 띠만 나타납니다. 이러한 SDS-PAGE 기술은 단백질 샘플의 순도를 분석하는 데 사용됩니다.
SDS-PAGE 분석 원리
SDS는 음이온 계면활성제로, 단백질의 수소 결합과 소수성 결합을 끊고 일정 비율로 단백질 분자와 결합하여 단백질이 갖는 전하량을 원래보다 훨씬 더 높게 만들어 다양한 단백질 분자 간의 자연적인 전하 차이를 가립니다. 따라서, 다양한 단백질-SDS 복합체의 전기영동 시 이동 속도는 단지 단백질 분자량에 의해 결정됩니다. 서로 다른 단백질은 분자량의 차이로 인해 SDS-PAGE 전기영동 후 분리되며, 단백질 염색을 통해 단백질 분리 결과를 분석합니다.
단백질 SDS-PAGE 분석 절차
1. 단백질 농도 측정 2. 샘플 처리: 단백질 샘플에 동일한 양의 B-메르캅토에탄올을 포함한 2x 로딩 버퍼를 넣고 10분 동안 가열합니다.
3. 전기영동 준비: 적절한 농도의 SDS 분리 젤을 준비하고, 전기영동 탱크를 설치한 후 1x 전기영동액을 주입합니다.
4. 단백질 샘플 로딩: 단백질 농도에 따라 적당량의 처리된 단백질 샘플을 전기영동 웰에 순차적으로 추가하고, 다른 빈 웰에는 단백질 표준 마커를 적당량 추가합니다.
5. 전기영동 시작: 전원을 연결하고 전압을 120v로 조정하여 일정한 전압을 유지합니다.
6. 전기영동 종료 및 젤 분리: 브로모페놀 블루가 젤 하부에 도달하면 전기영동을 멈춥니다. 단백질 젤을 꺼내고, 농축 젤과 분리 젤 하부의 브로모페놀 블루 젤 조각을 잘라냅니다.
7. 염색: R250 염색액을 사용하여 단백질 젤을 1시간 동안 염색합니다.
8. 탈색: 탈색액을 사용하여 염색된 단백질 젤의 배경을 깨끗하게 탈색하여 단백질 띠가 선명하게 보이도록 합니다.
9. 사진 촬영 및 분석
중/영문 프로젝트 보고서
기술 보고서에서 바이오텍 파크는 상세한 중영문 이중 언어 기술 보고서를 제공합니다. 보고서에는 다음이 포함됩니다:
1. 실험 절차 (중영문)
2. 관련 SDS-PAGE 매개변수 (중영문)
3. 단백질 순도 결과
SDS-PAGE 단백질 순도 분석 원스톱 서비스
주문 후 샘플 발송만 하면 됩니다
바이오텍 파크의 원스톱 서비스 완료: 샘플 처리 - 기기 분석 - 데이터 분석 - 프로젝트 보고서
