숙주 단백질 잔여물(HCP) 분석 서비스
많은 생물 의약품(항체, 백신, 재조합 단백질 등)의 제조는 여전히 생물 시스템 합성을 통해 이루어집니다. 다양한 정제 방법을 사용하더라도 생물 의약품에는 미량의 숙주 단백질 잔류물(HCP)이 있을 수 있습니다. 효모, 특히 피치아 효모와 사카로미세스 세레비시아는 생명공학 산업에서 자주 사용되는 숙주 세포 중 하나로, 우리가 필요로 하는 단백질을 발현하는 동안 자체 단백질도 발현합니다. 이를 효모 숙주 단백질 또는 효모 숙주 잔류 단백질이라고 합니다. 생물제제에 남아 있는 숙주 세포 단백질(HCP)은 외래 단백질로서 다양한 정도의 면역 반응을 유발할 수 있으며, 결국 알레르기 반응이나 기타 부작용을 초래할 수 있습니다. 따라서 생물제제의 품질을 모니터링하기 위해 적절한 HCP 검출 방법을 구축해야 합니다.
ELISA는 현재 가장 널리 사용되는 HCP 검출 방법입니다. 이 기술은 상대적으로 간단하고 정밀도가 좋으며, 제어 범위를 설정하고 기술 사양을 수립하기에 용이합니다. 중국 약전 2010년판 세 번째 부에서는 HCP 검출에 효소연계면역흡착법을 사용해야 한다고 요구하고 있습니다. 이 검출 방법에서는 생물제제에 존재하는 HCP를 면역원으로 하여 생산된 항체의 품질이 매우 중요합니다. 상용 ELISA 키트든, 자가 제작한 다클론 항체든, 특이성과 적합성이 충분히 높지 않으면, HCP 누락 검출의 위험을 초래하게 되며, 이는 생물제제의 품질 안전에 위험을 초래할 수 있습니다.
ELISA의 생물제제 개발 과정에서의 응용
효모 숙주 단백질 잔류 분석——ELISA 방법의 장점
1）높은 민감도: ELISA 방법은 극히 낮은 농도의 목표 단백질을 검출할 수 있으므로 미량의 숙주 단백질 잔류를 검출하는 데 매우 중요합니다.
2）높은 특이성: 효모 숙주 단백질에 대한 특이 항체를 사용하여 ELISA는 목표 단백질과 다른 비특이 단백질을 구분할 수 있으므로 정확성을 보장합니다.
3）정량화 능력: ELISA는 숙주 단백질 잔류를 정성적으로 검출할 뿐만 아니라 단백질 농도를 정량적으로 평가할 수 있습니다.
4）강한 적응성: ELISA 방법은 다양한 유형의 효모 숙주 단백질에 맞게 조정할 수 있으며, 다양한 생산 공정 및 약물 제제에 적용할 수 있습니다.
5）고처리량: ELISA 방법은 미세구멍판을 사용하여 여러 샘플을 동시에 처리할 수 있어 분석 효율을 크게 향상시킵니다.
6）비용이 상대적으로 낮음: 다른 고급 단백질 분석 방법에 비해 ELISA는 재료 및 장비 비용이 상대적으로 낮습니다.
바이오테크놀로지(BTP)는 고정밀 자외선-가시광선 분광광도계를 활용하여 효소연계면역흡착 원리에 따라 숙주 단백질 잔류 ELISA 분석 플랫폼을 개발하였으며, CNAS/ISO9001 이중 품질 인증 시스템을 통해 숙주 단백질 잔류에 대한 정성 및 정량 분석을 효율적이고 정확하게 수행할 수 있습니다. 다양한 생물제제의 품질 및 안전 검출에 널리 사용되며, 무료 상담을 환영합니다!
또한, 생물 의약품에 남아 있을 수 있는 숙주 단백질을 정밀하게 검출하기 위해 바이오테크놀로지는 2D DIGE 기반의 HCP 항체 유효성 검출 서비스를 제공합니다. 먼저 숙주 세포 전체 단백질을 추출하고, 전체 단백질과 전체 단백질 항체를 각각 다른 형광으로 표지합니다. 그런 다음 2D 기술을 사용하여 숙주 세포 전체 단백질을 효율적으로 분리하고, 레이저 스캐너에서 2D 젤을 스캔하여 해당 채널의 숙주 세포 전체 단백질 스캔 이미지를 얻습니다. 그런 다음 2D 젤의 단백질을 막으로 옮기고, 막을 전체 단백질 항체와 함께 배양한 후, 레이저 스캐너를 사용하여 막을 스캔합니다. 항체와 항원의 결합으로 인해 해당 채널에서 항체에 해당하는 단백질의 스캔 이미지를 얻을 수 있습니다. 두 스캔 이미지를 비교하고 소프트웨어를 사용하여 분석하면 항체의 전체 단백질에 대한 커버리지를 확인할 수 있습니다.
기술적 장점
높은 민감도:2D-DIGE에서 사용하는 샘플 양은 2D 염색보다 훨씬 적으며, 이는 샘플 양이 적은 샘플에 매우 적합한 방법입니다.
넓은 동적 범위:2D DIGE의 높은 민감도와 넓은 동적 범위는 함량이 높거나 매우 낮은 단백질을 검출하는 데 유리하며, 2D보다 높은 검출 범위를 제공하며, 결과가 더 정확합니다.
간단한 조작, 높은 반복성:전통적인 2D 검출에서는 두 개의 젤을 실행해야 하며, 하나는 HCP 총 단백질 염색용, 다른 하나는 항체 면역 단백질 염색용입니다. 그런 다음 두 젤의 결과를 비교해야 합니다. 하지만 2D DIGE는 같은 젤에서 작업하여 여러 번의 젤 실행과 비교 간 오류를 방지합니다
실험 절차
숙주 단백질 잔류(HCP) 분석 절차
서비스 장점
경험이 풍부한 기술자가 실험 설계, 샘플 검출, 데이터 분석 등 전체 전문 서비스를 제공합니다;
명확한 절차로 불필요한 샘플과 시간 낭비를 줄이며, 짧은 납기 시간
샘플 요구 사항
HCP 단백질:고객은 균체 침전물 또는 세포를 제공하여 총 단백질을 추출할 수 있으며, 이미 추출한 총 단백질을 제공할 수도 있습니다. 균체 침전물은 1g 이상, 세포 침전물은 1×10^7 이상이어야 합니다. 단백질 용액 또는 동결 건조 분말 모두 가능하며, 총량은 1mg 이상, 용액 농도는 1ug/ul 이상이어야 합니다.
항체:항체 총량은 50ug 이상이어야 합니다.
사례 전시
2D-DIGE 검출 사례 전시
2D-DIGE 검출 사례 예시
관련 서비스
How to order?
