당화 분석은 가장 도전적인 번역 후 수정 분석 중 하나입니다. 당화 수식은 일반적으로 개별 수정이 아닌 그룹 단위로 발생합니다. 단일 단백질의 당화 위치조차도 서로 다른 길이의 체인과 다양한 가지를 연결하는 다양한 당 이성체를 가질 수 있습니다. O-당화(O-Glycan, O당 또는 O올리고당이라 불림)는 주로 말단 단당류 잔기와 세린 또는 트레오닌의 OH 그룹 사이의 글리코사이드 결합을 통해 폴리펩타이드와 연결됩니다. O당이 연결된 아미노산의 공통 서열은 아직 명확하지 않으며, O당의 구조는 다양하여 상대적으로 이질적인 핵 구조를 가진 여러 구조적 가족으로 나눌 수 있습니다.
O-연결 올리고당의 다양한 핵 구조
N-당과 달리, 현재 대부분의 O당을 소화할 수 있는 일반적인 효소는 없습니다. O-올리고당 효소는 대체되지 않은 O-GalNAc 이당류로 시작하는 올리고당만을 효소 분해할 수 있습니다. 따라서 화학적 방법으로 O-올리고당을 가수분해하는 것이 더 일반적인 방법이며, 대부분의 O-올리고당은 O-당 펩타이드에서 방출될 수 있으며, 이를 β-제거라고 합니다.
당 분석 시 샘플 준비의 일반적인 절차
MALDI-TOF MS를 사용하여 O-올리고당을 분석할 수 있습니다. 유도 반응 후 메틸화된 O-올리고당을 분석하여 모든 하이드록실기를 메틸 에터로 전환하고 카복실기 상의 시알산을 메틸 에스터화하여 안정화시킨 후 MALDI TOF MS가 양이온 모드에서 O-당을 분석할 수 있게 합니다. 메틸화된 O-당의 질량분석을 통해 올리고당 구성에 대한 정보를 얻을 수 있습니다.
질량분석 기반의 O올리고당 분석 개요도
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중/영어 프로젝트 보고서
기술 보고서에서는 바이텍 파크가 상세한 중영문 버전 기술 보고서를 제공하며, 보고서에는 다음이 포함됩니다:
1. 실험 절차 (중영문)
2. 관련 질량분석 매개변수 (중영문)
3. 질량분석 이미지
4. 원본 데이터
5. O-당 분석 결과
