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고처리량 유전자 결실 서비스

포유류 유전자 '노크아웃'은 유전자 기능 연구 또는 약물 타겟으로서의 잠재력을 연구하는 중요한 방법으로, 알츠하이머병, 암, 심혈관 질환, 염증 또는 대사 질환 등의 신경퇴행성 질환 연구에 널리 사용되고 있습니다. CRISPR/Cas9은 유전체 서열을 정확하게 수정할 수 있는 혁신적인 유전자 편집 기술입니다. CRISPR은 세균과 고세균에서 발견되는 면역 시스템으로, 침입한 바이러스의 유전체를 인식하고 절단할 수 있습니다. Cas9 단백질과 이에 상응하는 안내 RNA를 도입하여 CRISPR/Cas9 기술은 특정 DNA 서열을 정확하게 위치 지정하고 절단할 수 있으며, 이를 통해 유전자 노크아웃, 점 돌연변이 및 유전자 삽입이 가능합니다. CRISPR/Cas9에 의한 유전자 편집은 막대한 임상 응용 잠재력을 가지고 있으며, 이 기술의 성숙도에 따라 약물 타겟 발견 및 검증, 유전자 기능 연구, 유전자 치료, 암 면역 요법 등 다양한 분야에서 점점 더 중요한 역할을 하고 있습니다.

Neil, C.; et al. ACS Synthetic Biology. 2022.

CRISPR/Cas9 유전자 노크아웃 기술

기초 연구 및 의약품 개발의 요구를 충족시키기 위해, 연구 분야에서는 일련의 타겟 유전자/전체 유전체의 노크아웃 세포를 신속히 확보해야 합니다. BTP 바이오테크놀로지는 최적화된 CRISPR/Cas9 시스템을 사용하여 고객에게 대량 유전자 노크아웃 서비스를 제공하며, 당사의 인간 전체 유전체 유전자 노크아웃 어레이 라이브러리는 완전한 인간 유전체를 커버합니다. 전체 유전체 어레이 노크아웃 라이브러리는 인간 원조세포에서 이미 높은 내포 검증을 완료하였으며, 80% 이상의 타겟이 70% 이상의 노크아웃 효율을 달성했습니다.

BTP는 가장 쉽고 편리한 대량 CRISPR 유전자 노크아웃 서비스를 제공하기 위해 최선을 다하고 있으며, 바이러스 포장, 플라스미드 준비, Cas9 농도 테스트 등을 포함하여 고객의 노크아웃 세포 선택, 노크아웃 가능 여부, 노크아웃 방법 및 노크아웃 효율 등 중요한 문제를 해결합니다. 단일/다중 유전자 노크아웃, 프레임시프트 돌연변이 및 대서열 노크아웃을 수행할 수 있습니다. 고객은 유전자명과 타겟 세포만 제공하면, BTP 바이오테크놀로지는 모든 후속 프로젝트를 담당합니다. 프로젝트 평가(타겟 유전자가 타겟 세포에서 발현되는지, 필수 유전자인지 여부), KO 실험, KO 세포 검증, KO 세포 동결 및 생 KO 세포 전달을 포함합니다.

서비스 장점

1. 샘플 적합성 강함

인간, 마우스의 세포주, 원조세포, 면역세포 및 iPS 세포 등에 적합합니다.

2. 유전자 필요성 및 발현량 분석

유전자 노크아웃 실험을 수행하기 전에, 우리는 생물정보학 및 단백질체학 데이터를 기반으로 다양한 세포에서 유전자 필요성과 발현량을 분석하여 실험의 가능성을 보장하고 실험 위험을 줄입니다.

3. gRNA의 새로 디자인 및 검증 불필요

우리는 인간 전체 유전체 gRNA의 모든 검증을 완료했으며, 약물과 관련된 타겟도 PCR 시퀀싱 검증을 완료하여 고객의 타겟에 대한 프리 실험을 통한 gRNA 검증이 불필요하며, 프로젝트 주기를 크게 단축합니다.

4. 대량 고효율

우리는 최적화된 CRISPR/Cas9 시스템을 사용하여 대량 유전자 노크아웃을 수행하며, 여러 sgRNA/타겟 유전자 디자인을 통해 높은 노크아웃 효율을 보장합니다. 80% 이상의 타겟 노크아웃 효율이 70% 이상이며, 단기 내(10일 내)에 높은 노크아웃 효율의 KO 풀을 제공하여 대부분의 응용 시나리오를 충족합니다.

5. 노크아웃 효율 이중 검증

유전자 노크아웃 후, 우리는 WB 실험에서 항체 KO 검증의 최선 방법인 Sanger 시퀀싱과 심층 단백질체학 기술을 사용하여 노크아웃 효율을 이중 검증하여 데이터 진실성을 두 배로 보장합니다.