문의 제출

이황화 결합 위치 분석

이황화 결합은 단백질 내의 중요한 구조적 단위로, 두 개의 시스테인 아미노산 잔기의 황 원자가 산화 환경에서 형성되며, 생물학적 활성과 기능에 결정적인 역할을 합니다. 이황화 결합은 세포 표면 수용체, 항체, 성장 인자, 호르몬, 효소 등의 단백질에 널리 존재하며, 쉽게 환원되거나 잘못 짝지어져 원래의 폴리펩타이드나 단백질의 구조와 생물학적 활성이 영향을 받을 수 있습니다. 이황화 결합 위치 분석은 단백질 구조 내에서 이황화 결합의 위치와 연결 방식을 결정하여 단백질의 구조와 기능을 심층적으로 이해할 수 있게 합니다. 생물 의약품의 제조 및 연구 개발 과정에서 잘못된 이황화 결합 짝짓기는 약물의 무효화뿐만 아니라 잠재적인 안전 위험을 초래할 수 있으므로, 이황화 결합의 정확한 검출과 제어는 생물 제품 특성 분석에서 필수적입니다.

그림 1 이황화 결합 위치 분석 원리

액체 크로마토그래피-질량 분석(LC-MS) 기술의 발전은 검출의 민감도와 정확성을 크게 향상시켰으며, 이황화 결합 분석의 발전을 촉진하였습니다. 또한 이황화 결합 위치 분석에서 중요한 역할을 합니다. 바이오 테크놀로지 회사 BTP는 CNAS/ISO9001 이중 품질 시스템 인증을 받았습니다. 회사는 이황화 결합 분석 원리에 따라 고효율 액체 크로마토그래피와 고해상도 질량 분석기를 결합하여 이황화 결합 분석 플랫폼을 구축하여, 체인 내/체인 간의 이황화 결합, 한 쌍/다중 쌍 이황화 결합, 교차 중첩 또는 잘못 짝지어진 이황화 결합을 효율적이고 정확하게 식별할 수 있는 서비스를 제공합니다.무료 상담을 환영합니다. 더 많은 정보를 알아보세요!

실험기기

고효율 액체 크로마토그래피: Easy-nLC 1200 (Thermo Fisher Scientific)
고해상도 질량 분석기: Q Exactive™ Hybrid Quadrupole-Orbitrap™ Mass Spectrometer (Thermo Fisher Scientific)

사례 시뮬레이션

액체 크로마토그래피-질량 분석법으로 이황화 결합을 위치 지정할 때, 환원 처리를 하지 않고 직접 알킬화 과정을 거쳐 유리된 티올기를 봉쇄합니다. 그런 다음, 효소 절단을 통해 단백질 분자를 작은 조각으로 자릅니다. 이 과정에서, 이황화 결합이 존재하는 시스테인 사이에 특정 연결이 형성되어 분자량이 변화합니다. 다음으로, 질량 분석기로 데이터를 수집하고 해당 분석 소프트웨어를 사용하여 데이터베이스와 매칭하여 이황화 결합 정보를 얻습니다.

표 1 이황화 결합 분석

Site: 단백질 내에서 이황화 결합을 형성하는 시스테인의 위치; Enzyme: 단백질을 효소로 분해할 때 사용되는 효소; Peptide: 펩타이드 서열; Peptide_Mass: 펩타이드 분자량; Mass_Error(ppm): 펩타이드의 질량 오차

그림 2 펩타이드 이차 구조도

자주 묻는 질문

질문 1: 질량 분석법이 이황화 결합을 식별하는 데 어떤 장점이 있습니까?

답변:질량 분석법은 이황화 결합을 식별하는 데 여러 가지 장점을 가지고 있습니다. 첫째로, 이 방법은 이황화 결합의 존재와 수량뿐만 아니라, 이황화 결합의 구체적인 위치와 상대적인 함량을 결정할 수 있어 더욱 상세한 정보를 제공합니다. 둘째로, 질량 분석법은 높은 민감도와 높은 해상도를 가지고 있어 낮은 농도에서도 정확하게 이황화 결합을 검출하고 정량화할 수 있습니다. 또한, 질량 분석법은 샘플 소모량이 비교적 적어 소중하거나 제한된 샘플에 대해 중요한 의미를 가집니다. 따라서, 질량 분석법은 이황화 결합 분석에 널리 사용되며, 단백질 구조와 기능 연구에 강력한 지원을 제공합니다.

질문 2: 왜 알킬화를 해야 합니까?

답변:알킬화를 하는 것은 실험 과정에서 이황화 결합이 잘못 짝지어지는 것을 방지하기 위해 유리된 티올기를 봉쇄하기 위한 것입니다. 질량 분석에서, 샘플 준비 과정에는 특수한 처리가 필요하며, 여기에는 알킬화 단계가 포함됩니다. 알킬화는 알킬화 시약을 티올기와 반응시켜 티올기를 알킬로 대체하여 알킬티올을 형성하는 과정입니다. 이렇게 함으로써 티올기 사이의 반응을 효과적으로 방지하고, 실험 과정에서 비정상적인 이황화 결합 연결이나 잘못된 짝지어짐을 피할 수 있습니다. 알킬화 처리를 통해 질량 분석에서 정확하고 신뢰할 수 있는 이황화 결합 정보를 얻을 수 있으며, 단백질의 구조와 기능 특성을 밝히는 데 도움이 됩니다.

한/영 프로젝트 보고서

기술 보고서에서, BTP는 한/영 이중 언어로 된 상세한 기술 보고서를 제공합니다. 보고서에는 다음이 포함됩니다:

1. 실험 단계 (한/영)
2. 관련된 질량 분석 매개변수 (한/영)
3. 이황화 결합 위치 분석 상세 정보
4. 질량 분석 이미지
5. 원본 데이터