유세포 분석 및 고체화 기술의 대중화와 미세구 기반 다중 지표 검출 기술의 혁신적인 발전에 따라 유세포 분석을 통해 용해성 단백질의 정성 및 정량 분석이 가능합니다. 전통적인 ELISA 기술이 하나의 지표만 검출할 수 있는 것과 달리, 유세포 다중 지표 검출 기술은 하나의 샘플에서 여러 지표를 동시에 검출할 수 있으며, 이는 연구자의 작업 효율을 크게 향상시키고 희귀한 샘플에 대한 다중 지표 분석을 가능하게 합니다. 대표적인 기술로는 Luminex, BD CBA (cytometric bead array system, CBA), 그리고 eBioscience의 FlowCytomix 기술이 있습니다. Biotepak은 BD의 CBA 기술 및 FlowCytomix 기술을 사용하여 연구자들에게 다중 파라미터 세포 인자 또는 기타 용해성 분자의 검출 서비스를 제공합니다.
검출 원리:
이 기술의 검출 원리는 샌드위치 면역 측정법과 동일합니다. 형광 미세구는 선택된 항원 특이적 항체로 코팅됩니다. 항체가 코팅된 미세구 혼합물은 샘플과 배양됩니다. 샘플 내 검출 대상 물질(예: 사이토카인 등)은 미세구에 코팅된 항체와 결합합니다. 생물소가 붙은 항체 혼합물은 포획 항체(미세구)에 결합된 검출 대상 물질과 특이적으로 결합합니다. 마지막으로 Streptavidin-PE를 추가하여 생물소와 결합하여 형광 검출을 수행합니다. 유세포 분석기는 미세구의 크기와 형광 강도를 기준으로 미세구 그룹을 구분합니다. 두 가지 크기의 미세구(4.4μm, 5.5μm)는 각각 9, 11개의 서로 다른 강도의 형광 염료(적외선 형광, 아르곤, 헬륨 네온 및 자외선 광원으로 자극되며 방출 파장은 690nm)를 내부적으로 표시하여 유세포 분석기로 동시에 인식 및 구분할 수 있는 20가지의 서로 다른 미세구를 구성합니다. 따라서 하나의 샘플에서 최대 20가지 지표 검출이 가능합니다.
전통적인 ELISA 검출과 비교하여, 유세포를 사용한 다중 지표 검출의 장점은 다음과 같습니다:
유세포 사이토카인 검출의 장점
항체의 선택
현재 수백 종류의 항체가 이 기술에 사용 가능하며, 다양한 연구 요구에 따라 임의로 조합하여 개발할 수 있습니다. 자주 사용되는 검출 인자 조합은 일련의 유세포 시약 키트로 개발되어, 항체 맞춤 제작에 소요되는 시간을 크게 단축했습니다. 인간 샘플, 쥐 샘플, 마우스 샘플에 대한 단일 인자 및 다중 인자 유세포 시약 키트는 아래 표에 나와 있습니다(추가 항체가 개발 중이니 문의 바랍니다):
마우스 샘플 단일 인자 유세포 시약 키트
쥐 샘플 다중 인자 유세포 시약 키트
쥐 샘플 단일 인자 유세포 시약 키트
샘플 관련 정보
1. 25µL 샘플만 필요하며, 일반적인 ELISA는 50µL 또는 100µL 샘플이 필요합니다.
2. 혈청, 혈장, 세포 배양 상청 및 다양한 체액에 적합합니다.
3. 체액 샘플은 -80℃ 냉동고에 보관하며, 드라이 아이스를 사용하여 운송합니다.
중/영문 프로젝트 보고서:
최종 기술 보고서에서 Biotepak은 자세한 중영문 이중 언어 기술 보고서를 제공하며, 보고서에는 다음이 포함됩니다:
1, 실험 절차 (중영문)
2, 원시 데이터 (형광 발광 스펙트럼)
3, 기술 보고서
4, 각 검출 지표의 절대 함량 (Excel 표)
