막단백질 식별 서비스

막 단백질(수용체 및 이온 채널과 같은)은 세포 기능의 중요한 조절자입니다. 막 단백질은 알려진 약물 표적의 3분의 2를 차지하며, 이는 생물 제약 산업에서 막 단백질의 중요성을 보여줍니다.

그 중 G 단백질 결합 수용체(GPCR)는 가장 크고 널리 사용되는 막 수용체 단백질로, 가장 중요한 약물 수용체입니다. 이는 모든 인간 약물 표적의 50% 이상을 차지하며 암을 포함한 다양한 질병의 치료 표적으로 사용됩니다. 여기에는 심혈관, 대사, 중추 신경계 및 염증성 질환 등이 포함됩니다.

이온 채널은 또 다른 중요한 막 단백질 약물 표적으로, 현재 시판 중인 약물의 10%를 차지합니다. 그럼에도 불구하고, 약물 개발을 위한 충분한 수량의 순수하고 올바르게 접힌 형태의 막 수용체를 제조하는 것은 여전히 큰 도전 과제입니다.

Nan, L. et al. Lab on a chip. 2014.

막 단백질 식별

BTP-막 단백질 식별 서비스 일반 절차:

1. 세포질, 주위질 또는 세포 배양 상층액에서 막 단백질을 정제합니다. 사용한 발현 숙주 또는 발현 벡터에 따라 세포질, (박테리아) 주위질 또는 세포 배양 상층액에서 단백질을 정제합니다.
2. 용해도 및 정제를 증가시키기 위한 완충액 및 계면활성제 선별. 가용성 단백질 및 막 단백질에 대해 시차 주사 형광법(DSF)을 사용하여 안정성이 최적인 완충액 조건을 결정합니다. 적용 가능한 경우, 활동 분석법을 확립하여 안정성과 활성 상태를 연관시킬 수 있습니다. 막 또는 막 부착 단백질의 경우 박테리아 또는 진핵 생물의 막에서 단백질을 추출할 때 계면활성제를 사용해야 합니다. 계면활성제 사용은 단백질 안정성을 최적화하기 위해 추출 및 정제 단계에서 필요합니다. 단백질이 포함체로 발현된 경우, 재용해 및 재접힘이 완료된 후 최적의 계면활성제 및 완충액 조건을 최적화할 수 있습니다.
3. His, Rho1D4, GST 또는 strep 태그를 사용한 친화 정제. 고품질 친화 정제 매트릭스를 사용하여 His, GST 또는 Strep 태그와 같은 태그와 융합된 단백질을 정제할 수 있습니다. 막 단백질의 경우 Rho1D4 시스템 사용을 권장하며, 필요에 따라 다른 태그를 사용하여 정제할 수 있습니다. 당사의 정제 조건은 최적화되어 있으며, 목표 단백질에 따라 밀리그램 단위로 확장하여 정제할 수 있습니다. 서비스에는 최상의 안정성과 활성을 갖춘 단백질을 제공하기 위한 완충액 및 계면활성제 최적화가 포함될 수 있습니다. BTP 바이오텍은 SDS-PAGE 및 Western Blot 데이터 등을 포함한 모든 단계의 상세한 문서를 제공합니다.

결정화를 위한 단백질 구성 요소의 균질성을 준비하기 위한 추가 정제 단계가 있을 수 있습니다. 예를 들어, 음이온 또는 양이온 교환 크로마토그래피 또는 젤 필터링을 사용하여 단백질 결정화 실험 또는 기능적 결합 측정을 위한 적합한 단백질을 얻을 수 있습니다.