2D 블루 네이티브/SDS-PAGE 복합체 분석 서비스

생체막 내에서 많은 단백질들은 복합체 형태로 존재합니다. 바이오테크놀로지 회사인 Biotechpack는 2D Blue Native/SDS-PAGE를 이용하여 이러한 단백질 복합체의 소단위를 전반적으로 분석할 수 있습니다. 2D BN/SDS-PAGE 분석에서는 샘플이 블루 네이티브 폴리아크릴아미드 겔 전기영동을 통해 1차원으로 분리된 후,SDS-PAGESDS-PAGE를 통해 2차원으로 분리됩니다.

2D Blue Native SDS-PAGE 복합체 분석 서비스

단백질 복합체는 시간과 공간의 모든 복잡한 층위에서 세포와 세포소기관의 기능을 조직하고 유지할 수 있으며, 여기에는 세포 발달과 분열, 전사와 번역, 호흡작용과 광합성, 수송과 대사 과정이 포함됩니다. 단백질 복합체는 부분적이고 일시적인 변화를 나타낼 수 있으며, 다양한 안정성을 보일 수 있어 식별과 분석이 원활하지 않을 수 있습니다. BN-PAGE는 단백질 복합체의 고해상도 분리에 사용되는 기술입니다. BN-PAGE는 단백질 복합체의 크기, 상대적 풍부도 및 소단위 구성 분석에 활용될 수 있습니다.

2D BN-PAGE 분석에서, 단백질 또는 단백질 복합체 샘플은 자연 조건 하에서 1D BN-PAGE로 분리되며, 코마시 브릴리언트 블루 염료는 음전하를 띠며 모든 단백질에 비특이적으로 결합합니다. 코마시 브릴리언트 블루는 계면활성제로 사용되지 않아 단백질 복합체의 구조를 보존합니다. 또한, 코마시 브릴리언트 블루의 결합은 전기영동 과정에서 단백질 응집 경향을 줄여줍니다. 따라서 샘플의 전기영동 이동도는 결합된 코마시 브릴리언트 블루의 음전하와 복합체의 크기와 형태에 따라 결정됩니다. BN-PAGE로 분리된 후, 단백질과 단백질 복합체 샘플은 겔 내에서 SDS 변성을 거친 후 2D SDS-PAGE 겔 전기영동으로 분리됩니다.

BN-PAGE와 SDS-PAGE의 결합으로, 1차원에서의 그라데이션 겔과 2차원에서의 선형 겔에 의해, 단일체 단백질은 쌍곡선 대각선으로 이동하며, 단백질 복합체의 구성 성분은 해당 대각선 아래에 위치합니다. 동일한 단백질 복합체 소단위를 나타내는 단백질은 2차원에서 수직선 상에 위치하게 되며, 동일한 단백질이 가로선 상에 여러 지점을 가지는 것은 해당 단백질이 동시에 여러 다른 단백질 복합체에 존재함을 나타냅니다.
2D BN/SDS-PAGE 분석은 샘플의 크기, 수량, 단백질 구성, 화학량론 및 상대적 풍부도에 대한 정보를 제공할 수 있으며, 단백질 복합체 연구에 유용한 도구입니다.