어류의 장 내용물을 샘플링하여 후속 배양 작업을 진행하려면, 운송 중 어떻게 보관해야 하나요?
어류 장 내용물 수집 후 미생물 분리 배양 실험을 위한 경우, 운송 및 보관 조건이 미생물의 활성 및 군집 구조에 매우 중요합니다. 다음은 혐기성/통성 세균, 호기성 세균 분리에 적합한 전문적인 조언입니다.
운송 중 보존의 주요 원칙:
1. 저온(4°C) 운송 유지, 대사 억제
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채취 후 즉시 예비 냉각된 무균 원심관 또는 샘플 백에 넣고, 아이스박스/아이스팩에 보관하여 운송합니다.
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냉동(-20°C 이하) 금지, 특히 살아있는 세균을 필요로 하는 경우 세균 활성이 손상될 수 있습니다.
2. 장기간 공기 노출 방지(혐기성 세균 분리 시)
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혐기성 세균이 목표인 경우, 혐기성 샘플링 튜브(Anaerobe Transport Tube) 또는 질소가 충전된 밀폐 용기를 사용합니다.
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CO₂ 혐기성 봉투/혐기성 용기를 사용할 수 있습니다.
3. 보호제 추가 권장(선택사항)
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단시간 내에 배양이 불가능한 경우, 내용물을 무균 글리세롤 보호액(10–20% 글리세롤)에 혼합하여 임시 냉장 보관(4°C, <12시간)합니다.
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또는 샘플을 분할하여 -80°C에 냉동 보관할 수 있으나, 이 방법은 군집 DNA/RNA 보존에 적합하며 살아있는 세균 분리에는 권장되지 않습니다.
4. 운송 시간을 24시간 내로 최대한 단축
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운송은 빠를수록 좋으며, 채취 후 즉시 실험실이나 배양 기지로 이송하는 것이 좋습니다.
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거리가 먼 경우, 드라이아이스를 사용한 운송(DNA 추출/대사체/증폭체 연구용)을 고려할 수 있지만, 살아있는 세균 배양에는 적합하지 않습니다.
5. 기타 주의 사항
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알코올, RNA later 등의 보존액 사용 금지: 이러한 것들은 세균을 억제/사멸시킬 수 있으며, 메타게놈 또는 대사체 연구에는 적합하지만 분리 배양에는 적합하지 않습니다.
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반복적인 동결 해동 방지: 일시 보관이 필요한 경우, 단일 동결 후 신속히 분할 사용해야 합니다.
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무균 소모품 및 냉장 도구를 사전에 준비: 샘플링 전에 무균 동결관, 냉장 상자, 무균 장갑 등을 준비해야 합니다.
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