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질량분석법 N말단 서열 분석

질량 분석법 N말단 서열 분석은 질량 분석 기술을 활용하여 단백질/펩타이드 N말단의 아미노산 서열을 효율적이고 정확하게 측정하는 방법입니다. 높은 민감도, 높은 해상도 및 고처리량의 장점으로 인해 복잡한 단백질/펩타이드 혼합물 분석, 변형, 돌연변이 및 기타 서열 변이를 식별하는 데 사용할 수 있습니다. 전통적인 Edman 분해법과 비교하여 질량 분석법은 더 높은 처리량과 민감도를 가지고 있으며, 더 복잡한 샘플과 더 큰 단백질을 분석할 수 있습니다.

고해상 질량 분석법을 기반으로 한 N말단 서열 분석은 샘플을 SDS-PAGE로 목표 단백질을 분리한 후 단백질 분해 효소로 소화하여 Q-Exactive 시리즈 질량 분석기(Thermo Fisher Scientific)를 사용하여 질량 분석을 수행합니다. 펩타이드는 질량 분석기에서 b, y 이온의 이차 질량 스펙트럼을 생성하며, 스펙트럼을 단백질 이론 아미노산 서열과 비교하여 단백질의 N말단 위치를 확인합니다. 백태파크 바이오텍 BTP는 고성능 액체 크로마토그래피 및 고해상 질량 분석기를 결합하여 N말단 서열 분석 플랫폼을 구축하였으며, CNAS/ISO9001 이중 품질 시스템 인증을 통해 고품질의 질량 분석법 N말단 서열 분석 서비스를 제공합니다. 두 가지 다른 단백질 분해 효소 절단 방법을 사용하여 서로 다른 길이의 N말단 펩타이드를 생성하여 상호 검증을 통해 최종적으로 단백질 N말단 서열을 결정합니다.무료 상담을 환영하며, 더 많은 정보를 알아보세요!

질량 분석법 N말단 서열 분석의 두 가지 효소 절단 방법 비교

실험 장비

고성능 액체 크로마토그래피-질량 분석기: 고성능 액체 크로마토그래피 장비-Easy-nLC 1200
전자 분무-복합형 이온 트랩 Orbitrap 질량 분석기-Q Exactive™ Hybrid

Quadrupole-Orbitrap™ Mass Spectrometer

기술 장점

고해상 질량 분석법을 기반으로 한 N말단 서열 분석은 고해상도 질량 분석을 통해 N말단 폐쇄 및 번역 후 변형(PTMs)을 분석하여 단백질의 N말단 시작점을 확인할 수 있습니다.
복잡한 단백질의 경우, 당사는 복잡한 단백질에 대해 N말단 다이메틸화 표지를 지원하여 표지 위치를 분석하여 복잡한 단백질 샘플 내 여러 단백질의 N말단 시작점을 확인합니다.

사례 예시

단백질 약물 샘플의 N말단 아미노산 서열 분석:

Trypsin으로 소화된 샘플은 LC-MS/MS 분석을 통해 질량 스펙트럼 데이터를 얻으며, 질량 스펙트럼 데이터는 이론적 데이터베이스와 매칭하여 이론적 N말단 서열(HYAHVDCPGHADYVK)과 일치하는 MS2 스펙트럼을 얻습니다. 스펙트럼은 다음과 같습니다:

N말단 서열 이차 질량 스펙트럼

위의 분석을 통해 이 단백질 약물의 N말단 시작 아미노산이 히스티딘이며, N말단 서열이 HYAHVDCPGHADYVK임을 알 수 있습니다.

중/영문 프로젝트 보고서

기술 보고서에서 백태파크는 중영문 이중 언어 버전의 상세한 기술 보고서를 제공하며, 보고서는 다음을 포함합니다:

1. 실험 절차 (중영문)
2. 관련 질량 스펙트럼 매개 변수 (중영문)
3. 질량 분석법 N말단 서열 분석의 상세 정보
4. 질량 스펙트럼 이미지
5. 원시 데이터