IP 샘플이 실온에서 거의 하루 동안 방치되었고(이미 끓였음), 꺼내는 것을 잊고 기계가 밤에 꺼졌는데, 계속 사용할 수 있습니까?
다음 사항을 중점적으로 고려해야 합니다:
1. 단백질 완전성
1. 이미 끓였기 때문에(일반적으로 SDS와 환원제가 포함됨), 샘플의 대부분의 천연 구조와 효소 활성이 파괴되어 이론적으로는 더 이상 현저한 분해가 일어나지 않습니다.
2. 그러나 장시간 실온에 노출되면 일부 쉽게 침전되거나 불용성 성분이 응집될 수 있으며, 특히 고농도의 SDS나 요소가 포함된 경우 온도가 내려가면 쉽게 침출될 수 있습니다.
2. 미생물 오염 및 완충 시스템
1. 완충액에 항균제가 없으면(고농도의 SDS 제외), 장시간 실온에 방치하면 세균이 번식하여 샘플이 혼탁해지거나 분해될 수 있습니다.
2. Tris 등의 완충 시스템은 실온에서 pH가 약간 변할 수 있지만, 일반적으로 큰 영향을 미치지 않습니다.
3. 후속 사용 목적에 따라 계속 사용 가능한지 결정
1. SDS-PAGE/Western blot에만 사용한다면 기본적으로 계속 사용할 수 있지만, 침전물을 제거하기 위해 원심분리하고 필요시 재가열을 권장합니다.
2. 효소 실험이나 질량분석(특히 정량 질량분석)이 필요한 경우 직접 사용하지 않는 것이 좋습니다. 오염 및 변형(산화, 탈아미드화) 위험이 높아 데이터의 신뢰성에 영향을 미칠 수 있습니다.
처리 권장 사항:
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먼저 원심분리하여 명백한 침전물이나 혼탁이 있는지 확인합니다;
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WB만 하는 경우, 직접 사용하거나 재가열 후 사용합니다;
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질량분석이나 기능 실험을 하는 경우, 재제조를 권장하거나 최소한 대조군을 만들어 영향을 평가합니다.
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