면역침강(Immunoprecipitation, IP) 기술은 항체를 사용하여 용액에서 특정 단백질을 분리하는 기술로, 항원 정제 및 검출에 가장 널리 사용되는 방법 중 하나입니다. 용액에서 항체-단백질 복합체를 제거하기 위해 불용성 형태의 항체 결합 단백질(예: 한천 또는 최근 유행하는 자성 비드에 결합된 Protein A 또는 Protein G)을 추가합니다. 면역침강법은 항원 특이적 항체를 사용하여 복합 항원 용액에서 목표 항원을 분리하고, 폴리아크릴아미드 젤 전기영동(SDS-PAGE) 방법복합 단백질 혼합물에서 존재하는 항체 반응성 항원의 수와 크기를 분석합니다. 면역침강(IP)은 연구자가 단백질 혼합물에서 특정 단백질의 분자량과 양을 측정하고, 단백질 활성 상태와 번역 후 단백질 수정을 식별하며, 단백질 결합 파트너를 포획할 수 있게 합니다. 면역침강 측정법은 표적 단백질과 다른 단백질 또는 핵산의 상호작용을 검출할 수 있으며, 이 중 면역공침(Co-IP) 단백질 상호작용 분석법은 표적 단백질의 검출에 자주 사용됩니다.
Co-IP 면역공침법 단백질 상호작용 분석법은 단백질-단백질 상호작용을 발견하고 검출하는 데 널리 사용되는 강력한 기술입니다. Co-IP 면역공침법 단백질 상호작용 분석법의 원리는 항원-항체 상호작용을 이용하여 표적 단백질을 끌어내는 방식으로 상호작용하는 단백질을 추정하는 것입니다. 구체적으로, 표적 단백질의 항체를 친화성 수지에 고정한 후, 설계된 단백질 혼합물이나 세포 추출액에 노출시켜 표적 단백질과 강한 상호작용을 하는 단백질 또는 단백질 복합체를 공침시킵니다. 이러한 상호작용 단백질의 신원과 수는 후속 질량분석(MS)을 기반으로 한 상호작용 단백질 스펙트럼 분석 방법을 통해 식별할 수 있습니다.
바이타이파크의 표준 Co-IP 면역공침법 단백질 상호작용 분석법의 일반적인 절차는 다음과 같습니다:
• 단백질 혼합물, 세포 용해액 또는 조직 추출물 준비
• 항체가 결합된 친화성 비드와 단백질 혼합물, 세포 용해액 또는 조직 추출물 배양
• 여러 세척 단계를 통해 결합되지 않은 단백질 제거
• SDS-PAGE, 웨스턴 블롯 또는 질량분석(MS) 분석을 통해 상호작용 단백질 검출
다른 단백질 상호작용 방법과 비교하여 Co-IP 면역공침법 단백질 상호작용 분석법의 장점은 다음과 같습니다:
• 표적 단백질이 자연 상태로 끌어내려지므로 인위적 요인의 영향을 줄입니다;
• 전체 단백질 복합체를 끌어낼 수 있어 단백질 및 기능 경로의 특성화에 매우 유용합니다;
• 다양한 샘플 준비 및 단백질 식별 방법과 높은 호환성을 가집니다;
• 사용이 간단하고 명료합니다.
바이타이파크 생명공학은 고객에게 고품질의 Co-IP 면역공침법 단백질 상호작용 분석 서비스를 제공합니다. 우리는 샘플 단백질의 추출, 발현 및 정제의 최적화 계획을 제공하여 고품질의 유인 및 표적 단백질을 확보할 수 있도록 합니다. 또한, 맞춤형 방법을 제공하여 잠재적 상호작용 단백질을 특성화할 수 있습니다.
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