LC-MS 정량 원리는 무엇인가요?
LC-MS(액체 크로마토그래피-질량 분석기 결합)은 액체 크로마토그래피(LC)와 질량 분석기(MS)를 결합한 분석 기술입니다. LC-MS 정량의 원리는 액체 크로마토그래피를 통해 샘플을 분리하고, 질량 분석기를 통해 분리된 성분을 검출하고 정량하는 것입니다. 다음은 LC-MS 정량 원리의 주요 단계입니다.
1. 액체 크로마토그래피 분리:
LC-MS 시스템에서 먼저 액체 크로마토그래피를 사용하여 샘플의 성분을 분리합니다. 액체 크로마토그래피는 다양한 고정상과 이동상 및 그라디언트 용출 프로그램을 통해 성분을 분리합니다. 분리 효과는 크로마토그래피 칼럼, 유동상 및 용출 조건 등의 요소에 따라 달라집니다.
2. 전기 분무 이온화:
액체 크로마토그래피 분리 후 샘플 용액은 질량 분석기의 이온화 소스로 전달됩니다. 생물 분석에서는 전기 분무 이온화(ESI)가 가장 많이 사용됩니다. 전기 분무 이온화는 샘플 용액을 대전된 에어로졸로 변환한 후 에어로졸의 샘플 분자나 이온을 질량 분석기로 도입합니다.
3. 질량 분석 검출::
질량 분석기로 들어간 샘플 이온은 질량 분석기(예: 사중극자, 비행 시간, 궤도 트랩 등)를 통해 질량 대 전하 비율(m/z)에 따라 분리됩니다. 질량 분석 검출기는 검출된 이온 신호 강도가 샘플 농도와 비례합니다. 목표 이온의 신호 강도를 측정하여 샘플의 성분에 대한 정량 분석을 수행할 수 있습니다.
4. 정량 전략:
LC-MS 정량은 보통 외부 표준법, 내부 표준법 또는 다점 교정법을 사용합니다. 외부 표준법에서는 알려진 농도의 표준품을 측정하여 표준 곡선을 그린 후, 측정할 샘플의 신호 강도를 통해 농도를 계산합니다. 내부 표준법에서는 알려진 농도의 동위 원소 표지 내부 표준 물질을 추가하여 샘플 준비 및 분석 과정에서 발생할 수 있는 오차를 교정하여 정량의 정확성과 정밀성을 높입니다. 다점 교정법은 다양한 농도 수준에서 다점 교정 곡선을 설정하여 정량 결과의 신뢰성을 높입니다.
결론적으로 LC-MS 정량 원리는 액체 크로마토그래피 분리, 이온화, 질량 분석 검출 및 정량 전략을 포함합니다. 목표 성분의 신호 강도를 측정하고 계산함으로써 정확하고 정밀한 정량 분석을 수행할 수 있습니다.
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