SILAC는 세포 배양 조건에서 안정 동위원소 표지 기술(Stable Isotope Labeling By Amino Acids In Cell Culture, SILAC)의 약자입니다. SILAC 실험 과정은 다음과 같습니다: 세포 배양액에 가벼운, 중간 또는 무거운 안정 동위원소로 표지된 필수 아미노산 라이신(Lys)과 아르기닌(Arg)을 추가하여 세포 성장 과정에서 새로 합성된 단백질이 안정 동위원소 태그를 갖도록 합니다. 각 유형의 단백질을 동량 혼합하고, 효소 소화 후 질량 분석을 수행합니다. 1차 질량 스펙트럼에서 표지가 없는/동위원소 표지가 있는 질량 스펙트럼 피크의 면적 크기를 비교하여 상대적 정량을 수행하고, 2차 스펙트럼에서 펩타이드의 서열을 결정하여 단백질을 식별합니다. SILAC와 유사하게, 다이메틸(Dimethyl) 표지도 동위원소 단백질 표지 방법 중 하나입니다. 다이메틸은 화학 표지 방법으로 세포 용해 후 단백질이나 펩타이드의 N-말단 또는 라이신의 ε-아미노 그룹을 표지하여 단백질/펩타이드에 다른 다이메틸 태그를 표지합니다. 표지 방법의 차이 외에, SILAC/다이메틸의 질량 분석 방법은 기본적으로 동일하며, 분석 정밀도와 범위가 유사하여 정량적 단백질체학 연구에서 점점 더 널리 사용되고 있습니다.
바이타이 파크는 Thermo Fisher의 Q ExactiveHF 질량 분석 플랫폼, Orbitrap Fusion 질량 분석 플랫폼, Orbitrap Fusion Lumos 질량 분석 플랫폼과 Nano-LC를 결합하여 SILAC/다이메틸 기반 정량적 단백질체 분석 서비스 패키지를 제공합니다. 귀하의 실험 목적을 알려주시고 세포를 보내주시면, 세포 배양, 세포 표지, 단백질 추출, 단백질 소화, 펩타이드 분리, 질량 분석, 질량 원시 데이터 분석, 생물정보학 분석을 포함한 프로젝트의 모든 후속 작업을 책임집니다.
SILAC 정량적 단백질체학 실험 과정
SILAC 정량적 단백질체학 실험 과정
샘플에 대하여
1. 귀하는 동결 보관된 세포를 드라이아이스에 포장하여 보내주시면 됩니다. 동시에 세포가 최소 5회 이상 전대 배양할 수 있는 능력을 보장해야 합니다.
2. 귀하가 직접 세포를 표지하고 세포 자극 등의 과정을 완료하려면, 표지 및 처리 완료된 세포 샘플 또는 단백질 샘플을 드라이아이스에 포장하여 보내주시면 됩니다. 각 샘플은 50-100ug의 단백질을 포함해야 합니다.
Silac와 다이메틸 표지 방법 비교
SIALC와 다이메틸 표지 방법 비교
SIALC와 다이메틸 표지 방법 비교2
전반적으로, SILAC의 반복성은 다이메틸보다 약간 높습니다. 이는 다른 SILAC 샘플이 단백질 소화 전에 이미 혼합되어 있기 때문이며, 다이메틸은 소화 후 펩타이드 조각을 표지하여 시스템 안정성에 더 많은 영향을 받기 때문에 반복성이 다소 떨어집니다. 하지만 다이메틸은 저렴하면서도 우수한 표지 수단으로 점점 더 널리 사용되고 있습니다.
중/영문 프로젝트 보고서
기술 보고서에서 바이타이 파크는 귀하에게 자세한 중영문 이중 언어 기술 보고서를 제공합니다. 보고서에는 다음이 포함됩니다:
1. 실험 단계 (중영문)
2. 관련 질량 분석 매개변수 (중영문)
3. 질량 스펙트럼 이미지
4. 원시 데이터
5. 단백질 차등 수준 분석
6. 생물정보학 분석
SILAC/다이메틸 정량적 단백질체학 원스톱 서비스
주문하고 샘플을 보내주세요
바이타이 파크 원스톱 서비스 완료: 샘플 처리-기기 분석-데이터 분석-프로젝트 보고서
