생명체의 생명 활동에서 단백질 기능은 단백질과 단백질 간의 상호 작용을 통해 실현됩니다. 따라서 새로운 단백질 상호 작용을 연구하는 것은 단백질의 잠재적 기능을 연구하는 데 새로운 방향을 제공합니다. 다양한 단백질 상호 작용 식별 실험 중에서 Pull-down은 체외 단백질 상호 작용 검증과 새로운 상호 작용 단백질 발견에 자주 사용됩니다. Pull-down 실험은 고도로 정제되고 농축된 미끼 단백질을 사용하여 세포 내에서 상호 작용이 약하거나 농도가 낮은 표적 단백질을 포획하여 새로운 표적 단백질의 발견 효율을 크게 향상시킵니다. Pull-down 실험의 구체적인 단계는 GST, polyHis 또는 Biotin 표지 미끼 단백질을 발현 및 정제하고 고정화된 친화 리간드를 사용하여 미끼 단백질을 고체 기질에 안정적으로 결합시키며, 미끼 단백질과 시험할 세포 용해액을 혼합하여 배양합니다. 이 과정에서 미끼 단백질과 표적 단백질은 상호 작용하여 결합하며, 비특이적 결합의 잡단백질을 세척하여 제거한 후 미끼 단백질과 상호 작용하는 표적 단백질을 얻습니다. 그런 다음 질량 분석을 통해 표적 단백질을 식별합니다.
바이타이파크 회사는 수입된 GST pull-down 키트를 활용하여 단백질 상호 작용 실험을 빠르고 정확하게 완료할 수 있으며, 회사의 첨단 UPLC-MS 질량 분석 플랫폼과 결합하여 pull down 기반의 단백질 분석 원스톱 기술 서비스를 제공하며, 감도가 높고 분해능이 정확합니다. 우리는 pull down 실험 후 단백질 샘플을 검사할 수 있으며, 고객이 보내주신 샘플을 통해 pull down 실험부터 샘플 질량 분석까지 원스톱으로 해결해드립니다. 고객은 요구사항과 샘플을 보내주기만 하면, 우리는 프로젝트의 후속 모든 사항을 책임집니다. 여기에는 샘플 전처리, pull down, 질량 분석, 질량 원시 데이터 분석이 포함됩니다.
Pull-down 단백질 식별 프로세스
Pull-down 단백질 식별 프로세스
샘플에 관하여
1D SDS PAGE /2D PAGE 젤 샘플:
1. Coomassie Blue, SYPRO Ruby 및 Silver 염색 샘플은 모두 단백질 식별 시험을 수행할 수 있습니다.
2. 은 염색 샘플은 후속 질량 분석과 호환되지 않을 수 있으므로, 아래 제품 또는 실험 단계를 사용하여 은 염색 실험을 수행하는 것을 권장합니다:
ProteoSilver Plus, Sigma (제품 번호 PROTSIL1 또는 PROTSIL2)
Dodeca Silver Stain, BioRad (제품 번호 161-0481 또는 161-0480)
3. 은 염색 샘플은 탈색 처리를 하지 마십시오
액체 샘플 (In solution format):
1. 만약 샘플을 젤에 흐르게 해야 한다면, 1D SDS PAGE 샘플 준비 요구사항에 따라 준비하십시오;
2. 샘플의 단백질 양이 ＞10ug인 경우, 샘플의 버퍼 시스템에 대한 요구사항은 없습니다;
3. 샘플의 단백질 양이 ＜10ug인 경우, 샘플 준비 과정에서 SDS와 같은 계면활성제의 사용을 최소화하고 소금 농도를 낮추십시오;
4. 샘플 제출 시, 샘플의 버퍼 시스템과 샘플 내 단백질의 예상 함량을 함께 제공하십시오;
샘플 운송:
샘플을 동결 건조하여 운송하는 것을 권장합니다. 동결 건조 샘플의 단백질은 매우 안정적입니다;
액체 샘플은 드라이아이스로 운송을 추천하며, 단거리 운송에는 아이스 팩도 사용 가능합니다;
주의:
질량 분석을 통한 단백질 샘플 식별 시, 샘플 준비 과정에서 장갑과 헤어캡을 착용하여 자신의 케라틴(keratin)이 샘플에 오염되지 않도록 최대한 주의하십시오.
중/영문 프로젝트 보고서
기술 보고서에서, 바이타이파크는 고객에게 상세한 중영문 이중 언어 기술 보고서를 제공하며, 보고서에는 다음이 포함됩니다:
1. 실험 단계 (중영문)
2. 관련 질량 분석 매개변수 (중영문)
3. 질량 분석 이미지
4. 원시 데이터
5. 식별된 단백질의 상세 정보
Pull-down 표적 단백질 질량 분석 식별 원스톱 서비스
주문 - 샘플 발송만 하시면 됩니다
바이타이파크 원스톱 서비스 완료: 샘플 처리 - 기기 분석 - 데이터 분석 - 프로젝트 보고서
