ImageJ로 WB 정량 분석하는 방법
ImageJ를 사용한 Western Blot(WB) 정량 분석의 기본 단계는 다음과 같습니다:
1. 이미지 가져오기:
ImageJ 프로그램을 열고 ‘File’>‘Open’을 선택하여 WB 이미지를 가져옵니다.
2. 이미지 크기 및 대비 조정:
최상의 분석 결과를 얻기 위해 이미지의 밝기와 대비를 조정해야 할 수 있습니다. ‘Image’>‘Adjust’>‘Brightness/Contrast’를 선택하여 조정합니다.
3. 관심 영역 선택(ROI):
사각형 선택 도구를 사용하여 정량화하려는 밴드에서 영역을 선택합니다.
4. 분석:
‘Analyze’>‘Gels’>‘Plot Lanes’를 선택합니다. 이 기능은 선택한 각 밴드에 대한 피크 플롯을 제공합니다. 이 피크 플롯에서 밴드의 강도를 정량화할 수 있습니다.
5. 정량화:
밴드의 강도는 알려진 농도의 표준 샘플과 비교하여 샘플 내 목표 단백질의 함량을 정량화할 수 있습니다.
세포 표면의 두 가지 막 단백질의 분자 수를 측정할 때, Western Blot은 단백질의 상대적 또는 절대적 정량화를 위해 일반적으로 사용되지만, 세포 표면의 분자 수를 직접 결정하는 데 사용되지는 않습니다. 세포 표면의 단백질 분자 수를 정확하게 측정하려면 일반적으로 유세포 분석기와 같은 기술을 사용하고 형광 표지된 항체를 사용하여 목표 단백질을 표준화해야 합니다. 적절한 표준품과 결합하면, 유세포 분석기는 세포 표면의 분자 수를 추정할 수 있습니다.
BiotechPack, 바이오의약품 특성 분석 및 멀티오믹스 질량분석(MS) 서비스 제공업체
관련 서비스:
레이블 기반 단백질 정량 기술-iTRAQ, TMT, SILAC
TMT/iTRAQ/MultiNotch 정량 단백질체학 분석
How to order?
