MALDI-TOF MS의 작업 단계는 어떻게 되나요?
MALDI-TOF MS는 일반적으로 다음과 같은 주요 작업 단계를 포함합니다: 샘플 준비, 샘플을 기기에 주입, 레이저 탈착 이온화, 이온 가속 및 비행, 질량 분석 검출, 데이터 분석.
1. 샘플 준비
정제되거나 농축된 샘플(단백질, 펩타이드 등)을 매트릭스(일반적으로 유기산, 예: α-시아노-4-하이드록시신남산)와 비율에 따라 혼합합니다. 그런 다음, 마이크로 피펫을 사용하여 혼합물을 MALDI 타겟 플레이트에 점적하여 건조시켜 결정체를 형성합니다.
2. 샘플을 기기에 주입
샘플이 있는 MALDI 타겟 플레이트를 질량 분석기의 진공 챔버에 넣습니다. 진공 환경은 분자 간 충돌을 줄여주어 검출의 정확성을 높입니다.
3. 레이저 탈착 이온화
펄스 레이저를 사용하여 샘플과 매트릭스의 혼합물을 조사합니다. 매트릭스가 레이저 에너지를 흡수한 후 급격히 가열되면서 기화되고, 샘플 분자의 탈착 및 이온화가 이루어져 대전된 이온이 형성됩니다.
4. 이온 가속 및 비행
전기장이 생성된 대전 이온을 비행관으로 가속시킵니다. 대전 이온은 전기장이 없는 비행관에서 질량 대 전하비(m/z)에 따라 다른 속도로 비행합니다.
5. 질량 분석 검출
이온이 검출기에 도달하는 시간을 검출하여, 질량 분석기는 다양한 질량 대 전하비의 이온 비행 시간을 계산하고, 이에 따른 질량 스펙트럼을 생성합니다. 검출기에 도달하는 시간이 짧을수록 이온의 질량 대 전하비가 작음을 나타냅니다.
6. 데이터 분석
질량 분석 데이터는 전용 소프트웨어를 통해 처리 및 분석되어 질량 스펙트럼을 생성합니다. 샘플의 질량 스펙트럼을 알려진 데이터베이스와 비교하여 단백질의 동정 및 분석이 가능합니다.
전체 과정의 핵심은 레이저 탈착 이온화 기술을 통해 샘플 분자를 기체 상태의 이온으로 전환하고, 비행 시간을 통해 이러한 이온의 질량 대 전하비를 검출하여 샘플의 성분을 분석하는 것입니다.
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