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포르말린 고정 교차결합 후 단백질 농도를 측정할 수 없는데, 이 단계에서 교차결합을 제거해야 농도를 측정할 수 있는 건가요?

네, 포름알데히드 고정 교차 연결 후, 단백질의 구조와 용해도가 변화하여 단백질 농도 측정에 영향을 미칠 수 있습니다. 포름알데히드는 단백질 분자 사이에 공유 결합을 형성하여 단백질이 불용성의 망상 구조를 형성하게 만듭니다. 이렇게 교차 결합된 단백질은 전통적인 단백질 농도 측정 방법(BCA, Bradford 등)으로 검출하기 어렵습니다.

 

해결책:

  1. 교차 결합 제거: 정확한 단백질 농도 데이터를 얻기 위해서는 특정한 교차 결합 제거 단계(예: 제거제를 사용한 카바메이트, 요소 등)를 통해 단백질 간의 교차 결합을 해제해야 합니다. 이 단계는 단백질의 자연 구조를 복원하여 용해성을 회복시켜 농도 측정이 더 정확하게 이루어질 수 있도록 합니다.

  2. 적절한 측정 방법 사용: 교차 결합된 샘플의 농도를 측정해야 하는 경우, 교차 결합 단백질에 적합한 측정 방법(예: 자외선 흡수법)을 고려할 수 있으나, 이는 보통 교차 결합 제거 후 측정보다 정확하지 않습니다.

 

따라서, 단백질 농도를 정확하게 측정하기 위해서는 교차 결합을 제거하는 것이 일반적인 실험 절차입니다. 교차 결합을 제거하지 않으면 신뢰할 수 있는 농도 데이터를 얻기 어려울 수 있습니다.

 

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